Wako Pure Chemical
 
작성일 : 15-09-04
[Wako Pure Chemical] 미분화 인간의 배아줄기세포 및 iPS세포 제거 시약

 

rBC2LCN-PE23

미분화 인간의 배아줄기세포 및 iPS세포 제거 시약 - 배양액에 첨가하는 것 만으로 O.K

 

 

rBC2LCN (AiLecS1)는 Burkholderia cenocepacia 유래의 렉틴 인 BC2L-C의 N 말단 도메인을 대장균에서 발현

시킨 Recombinant lectin입니다. rBC2LCN는 미분화 인간 ES 세포, 인간 iPS 세포의 세포 표면에 존재하는 당쇄에

높은 특이성을 가지고 있습니다.

본 제품은 녹농균 유래 외독소의 촉매 도메인 (PE23)을 rBC2LCN의 C 말단에 융합시킨 재조합 단백질입니다.

rBC2LCN-PE23은 세포 내에 받아 들여진 후 단백질 합성을 억제하고 세포 사멸을 일으키는 것으로 인간 ES 세포,

인간 iPS 세포를 살상합니다. 살상된 세포는 배양 용기보다 부유하기 때문에 배지를 교환 함으로써 제거 할 수 있습

니다.

 

 

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rBC2LCN (AiLecS1) has very high specificity to sugar chain which exists on the surface of undifferentiated

human ES/iPS cells (hPSCs). So rBC2LCN is novel undifferentiated probe of hPSCs.

rBC2LCN-PE23 is recombinant lectin-toxin fusion protein of rBC2LCN with a catalytic domain of

Pseudomonas aeruginosa exotoxin A. rBC2LCN-PE23 enters in hPSCs, cause the inhibition of protein

synthesis and eliminate hPSCs.

 

 

Features

Selectively eliminate hPSCs which remaining after inducing differentiation

Only add to culture medium without disperse

 

 

Add rBC2LCN-PE23 (final conc. 10μg/ml) to culture medium of human iPS cells (201B7 strain). After 48 hours

in the presence of rBC2LCN-PE23, human iPS cells are eliminated in culture medium which rBC2LCN-PE23

was added.

 

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Protocols

1. prepare differentiated cells from hPSCs.

2. Add rBC2LCN-PE23 (final conc. 10μg/ml) to culture medium  (conc. of rBC2LCN-PE23 is described

    on the label.)

3. Incubate at 37℃ under 5% CO2 (Please set time when remaining undifferentiated cells are eliminated).

4. Culture in medium suitable for differentiated cells.

 

 

Usage example

 

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  Add rBC2LCN-PE23 (final conc. 10μg/ml)

  to culture medium of human ES cells (WA01

  strain). After 24 hours in the presence of

  rBC2LCN-PE23, human ES cells are

  eliminated in culture medium which

  rBC2LCN-PE23 was added.

 

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  Add rBC2LCN-PE23 (final conc. 5, 10, 20, 30,

  50μg/ml) to culture medium of normal human

  dermal fibroblasts (NHDF), and show viable

  cell number 48 hr later. NHDF are not

  eliminated. (relative cell number : 0μg/ml

  rBC2LCN-PE23 = 1)。

 

 

Reference

Tateno, H. et al.: Stem Cell Reports, 4, 811 (2015).

 

 

 

Ordering informations

Catalog No.

Product Name

Size

180-03231 (PDF)

rBC2LCN-PE23 (for cell culture)

100 μl

186-03233 (PDF)

100 μl x 5

 

* After thawing, store at 2~10℃ and use within four weeks. If you don’t use within four weeks,

  you should make aliquots and store at -20℃. Avoid repeating freeze-thaw.

 

 

 

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